红系分化相关基因相互作用蛋白质的分离与鉴定
作者：admin | 日期：2025-08-19
红系分化相关基因相互作用蛋白质的分离与鉴定
目的 制备红系分化相关基因(erythroid differentiation-associated gene,EDAG)蛋白的单克隆抗体,利用免疫沉淀联合质谱技术对EDAG相互作用蛋白质进行分离与鉴定.方法 构建EDAG原核表达载体,通过诱导、表达、纯化获得EDAG融合蛋白,杂交瘤技术建立分泌EDAG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,利用Western印迹筛选阳性杂交瘤细胞,免疫小鼠得腹水,最后用免疫共沉淀与质谱联合鉴定EDAG相互作用蛋白.结果 纯化获得EDAG重组蛋白,筛选出4株分泌EDAG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并制备了腹水.该抗体均可用于内源EDAG蛋白的检测,其中两种抗体可用于免疫共沉淀实验,运用质谱技术筛选获得EDAG候选相互作用蛋白.结论 利用EDAG单克隆抗体,筛选到EDAG候选相互作用蛋白质13种,涉及细胞增殖及转录等过程,为EDAG的功能研究及其分子机制的阐明提供了新的线索.
作 者： 徐诚望 王治东 李长燕 许望翔 詹轶群 于淼 杨晓明 XU Chengwang WANG Zhidong LI Changyan XU Wangxiang ZHAN Yiqun YU Miao YANG Xiaoming 作者单位： 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京市,100850 刊 名： 医学分子生物学杂志 ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 2008 5(4) 分类号： Q71 关键词： 单克隆抗体 免疫共沉淀 质谱 相互作用蛋白质